В изучении патогенеза развития основных заболеваний слизистой оболочки полости рта, вызываемых продуктами переработки нефти, помимо клинических наблюдений, большое значение приобретают экспериментальные исследования. Учитывая практическую значимость данных вопросов, так необходимых для эффективной профилактики бластомогенного действия ароматических углеводородов нефти, мы предприняли изучение морфологических изменений слизистой оболочки полости рта на разных стадиях развития патологического процесса в ней.
С целью изучения механизма развития выявленной патологии у рабочих нефтехимической промышленности нами проведены экспериментальные исследования. Хронический эксперимент поставлен на 200 белых беспородных крысах-самцах весом 120—130 г. Эксперимент проводился в летний период времени. Крысы были помещены в затравочные камеры объемом 200 л. Для выявления воздействия факторов нефтеперерабатывающего производства в камерах появились нефтехимические вредные вещества в концентрации, обнаруживаемой в цехе. В течение 1 мес по 4 ч в сутки, т. е. создавались условия, близкие по длительности стажу работы и длительности рабочей смены, соответствует стажу работы 5 лет и длительности смены 8 ч.
Нами проведено 5 серий опытов на белых крысах. Экспериментальные животные всех серий находились на рационе вивария.
Далее были проведены серии опытов: I серия опыта — 40 белых крыс, которые находились в помещениях установок на: обычном пищевом рационе. II серия опыта — 40 крыс, в которых внутрижелудочно ежедневно вводили раствор витамина В
По окончании эксперимента животные подвергались декапитации. Для гистологического исследования брали язык и кусочки щеки. Материал помещали в 10% раствор нейтрального формалина. В дальнейшем изучаемый материал проводился через набор спиртов, восходящих концентрацией и заливался парафин. Изготовлено 400 парафиновых блоков от подопытных животных и 50 от контрольных, гистологические препараты окрашивали гематоксилином и эозином и по Ван-Гизону. Применяли специальные гистохимические методики окраски, направленные на выявление кератина — основным коричневым по М.Г. Щубичу (1962), уровня нуклеиновых кислот (ДНК и РНК) в ткани эпителия слизистой оболочки полости рта — галлоцианином по методике де Бер и Сарнакер (1956), гликогена и нейтральных гликопротеидов — ШИК-реакция по А.Л. Шабадашу (1947) с контрольной обработкой срезов амилазой.
Результаты клинических и экспериментальных исследований подвергали вариационно-статистической обработке по критерию Стьюдента—Фишера с определением среднеарифметической (М), ее ошибки (m), критерия (t), вероятности нулевой гипотезы (Pt). Достоверными считали те результаты, у которых процент допустимой ошибки был не более 5%, т. е. р<0,05. Полученные данные обработаны методом вариационной статистики.
В V серии эксперимента у животных, получавших весь комплекс витаминов (В
Через 1 нед от начала эксперимента в эпителии слизистой оболочки полости рта белых крыс патологических изменений не обнаружилось. Акантоз умеренный, как и ороговение. В срок опыта 2 нед эпителиальный пласт местами истончен, в других несколько утолщен. В этих участках отмечалась незначительная активность клеток базального слоя. Акантоз выражен умеренно. Ороговение эпителия незначительное. Через 3 нед эксперимента слизистая оболочка полости рта соответствовала ее нормальному строению. Ороговение эпителия на всем протяжении выражено слабо, лишь в кончике языка умеренное. В срок опыта 1 мес гистологическая картина в слизистой оболочке полости рта соответствовала предыдущему сроку. На протяжении 1,5 мес эксперимента в слизистой оболочке полости рта никаких изменений не наблюдалось, ороговение эпителия незначительное. В сроки опыта 2—3 мес результаты были идентичны между собой и аналогичны нормальному строению слизистой оболочки полости рта белых крыс, причем ороговение было выражено слабо и отмечалась обильная васкуляризация подлежащих под эпителием тканей. Интенсивность окраски галлоцианином базального слоя эпителия была во все сроки умеренной, что указывало на невысокий уровень нуклеиновых кислот. При окраске основным коричневым зона ороговения эпителия была незначительной по толщине и интенсивности окраски, что связано с незначительным содержанием здесь кератина. Тканевые базофилы встречались в мышечном слое редко, интенсивность их реакции на гепарин умеренная. В более поздние сроки эксперимента (2—3 мес) отмечалась сеть умеренно расширенных мелких кровеносных сосудов в слизистой оболочке полости рта у животных III и V серий.
Гистохимические методы окраски галлоцианином показали среднюю интенсивность окраски базального слоя эпителия слизистой оболочки полости рта у животных II серии и слабую в III, IV, V сериях опыта, что говорило об умеренном синтезе нуклеиновых кислот в эпителии.
При окраске основным коричневым слабая интенсивность окрашивания рогового слоя эпителия и его наибольшая толщина у животных IV и V серий опыта и уменьшение интенсивности окраски и толщины этого слоя по мере продолжительности опыта во II и III сериях указывали на умеренное содержание кератина. Тканевые базофилы встречались в небольшом количестве преимущественно в мышечном слое и интенсивность окраски их на гепарин была умеренной.
При проведении ШИК-реакции (Шабадаша) и контрольной обработки срезов амилазой гликоген в эпителии слизистой оболочки полости рта не выявлялся на протяжении всего эксперимента, а уровень нейтральных гликопротеидов был низким. Полученные нами результаты эксперимента, подтверждающие картину развития кератоза слизистой оболочки полости рта в условиях нефтеперерабатывающего производства в I серии опытов и благоприятное действие витаминов В